小鼠腹股沟区异位心脏移植模型成功建立

2015-10-25 12:24 来源:丁香园 作者:Vera
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英国医学研究理事会(MRC)移植研究中心(伦敦国王学院)Nowocin 教授等成功建立小鼠腹股沟区异位心脏移植模型,符合动物实验的 3Rs 原则,推动了科学研究方面动物福利的进步。该简讯发布在近期的 American Journal of Transplantation 上。

先送上一个视频,看看该模型建立的过程:

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动物实验的 3Rs 原则,即减少(reduction)、优化(refinement)和替代(replacement),也就是能够减少所需动物数量的,或能够使动物实验程序得以优化,或能够替代动物实验,而使动物免受痛苦的任一种方法或程序。小鼠异位心脏移植模型由 Corry 和同事首次提出,用于研究排斥反应机理和移植免疫耐受诱导方案,理解基本免疫机制及测试抗排斥新疗法,广泛应用于器官移植领域。

最初的腹腔内异位心脏移植模型中,需对受体小鼠行剖腹术,将供体主动脉和肺动脉分别与受体腹主动脉和下腔静脉作血管吻合,即血流从受体主动脉逆流入供体主动脉,经冠状动脉灌注供体心肌,经冠状窦流入供体心脏右房,进入右室,收缩期进入肺动脉,继而入受体下腔静脉。术中为暴露主动脉和下腔静脉,需将大小肠和盆腔器官等推向一侧,操作复杂,术后存在一定死亡率和并发症。

另一常用模型为颈部异位心脏移植,将供体主动脉和肺动脉分别与受体颈动脉和颈内动脉作血管吻合,术中需切除颌下腺和胸锁乳突肌以确定手术入路,因钳夹颈动脉导致大脑血供中断,此操作存在一定风险。

小鼠腹股沟区异位心脏移植模型中,研究人员采用 6-8 周的雄性 C57BL/6 小鼠(购自英国 Harlan 公司),饲育于无菌环境。供体心脏的术前准备与腹腔内异位心脏移植相同,置于预冷生理盐水中。将供体主动脉和肺动脉分别与受体股动脉和股静脉作血管吻合(具体步骤如下图 A-I)。


图 A. 于受体小鼠左侧腹股沟区作一斜切口,约 2 cm


图 B. 游离股静脉、股动脉和股神经,钝性分离股神经

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图 C. 用 7-0 丝线结扎股静脉属支(箭头所示)


图 D. 用血管夹夹闭股动脉和股静脉

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图 E. 用 27 G 穿刺针行股静脉、动脉切开

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图 F. 用维纳斯弹簧剪扩大切口

从下一步起,血管吻合与腹腔内异位心脏移植基本一致。

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图 G. 放置第一个缝线锚钉,确认股动脉切开部位,便于与供体主动脉边缘吻合

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图 H. 于对侧放置第二个缝线锚钉,沿主动脉边缘作 4-5 针连续性缝合(端侧吻合)

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图 I. 以同样方式吻合供体肺动脉和受体股静脉,注意不要缝到血管内壁(箭头所指),以免供体心脏位置翻转

吻合完成后移除血管夹,灌注供体心脏,最后用 4-0PGA 缝合线关闭腹股沟区皮肤切口。术后密切监测生命体征,评估疼痛指标。该模型心肌灌注后,复跳时间相较腹腔内异位心脏移植延迟 30s-60s,比颈部异位心脏移植迅速,对排斥反应影响小。

腹股沟区异位心脏移植术的最大优点是操作简便,加之腹股沟区部位表浅,术野清晰。其成功率略低于腹腔内异位心脏移植术,但不破坏腹部肌肉组织和腹膜的完整性,侵入性小,术后镇痛需求少、恢复快、死亡率低。相比颈部异位心脏移植,不影响大脑血供,无需切除颌下腺和胸锁乳突肌。

作者提出腹股沟区异位心脏移植可作为腹腔内异位心脏移植后二次移植的术式选择,用于减少移植相关损伤,或需避免淋巴引流入腹,认为模型应用前景良好。此技术的主要挑战是相比供体主动脉,股动脉血管内径小,缝合技术要求高,需避免吻合口狭窄。

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编辑: 程培训

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